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NIBSC93/722白介素10試劑盒的使用方法

發(fā)布時間: 2022-05-12  點擊次數(shù): 1325次
  NIBSC93/722白介素10是由160個氨基酸組成4個α螺旋結(jié)構(gòu)的的細胞因子,分子量為18.5 kDa。在水溶液中以二聚體形式存在,分子量約為39 kDa。是個多效性的因子,能夠?qū)Χ喾N細胞起作用,主要表現(xiàn)為免疫抑制和免疫刺激兩方面的作用,特別是在調(diào)節(jié)淋巴系和髓系的細胞功能方面扮演重要的作用。IL-10 也具有單核細胞/巨噬細胞依賴、抗原刺激引起的的PBMNC 和 NK 細胞合成其它細胞因子的抑制作用。巨噬細胞膜介導(dǎo)的共刺激引起的T細胞和NK細胞活化后的產(chǎn)物及功能也可被IL-10所抑制。
 
  IL-10是單核細胞/巨噬細胞功能的強有力的調(diào)節(jié)物。IL-10作為細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的抑制物,能夠抑制像前列腺素E2、TNF-α、IL-1、IL-10和 IL-8等許多引起炎癥的細胞因子。IL-10 能夠促進可溶性TNF受體的釋放和ICAM-1和B7在細胞表面的表達。IL-10還參與B細胞、柱狀細胞及胸腺細胞的增殖和分化的調(diào)控。
 
  NIBSC93/722白介素10劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中IL-10 的濃度。IL-10 捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上,當加入標本或參考品時,其中的IL-10 會與捕獲抗體結(jié)合,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當加入生物素化的抗人IL-10 抗體后,抗人IL-10 抗體與IL-10 接合,形成夾心的免疫復(fù)合物,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標記的親合素。
 
  生物素與親合素特異性結(jié)合,親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來;其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。加入顯色劑,若樣本中存在IL-10 將會形成免疫復(fù)合物,辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì),在加入中止液后呈黃色。通過酶標儀檢測,讀其450nm處的OD值,IL-10 濃度與OD450值之間呈正比,通過參考品繪制標準曲線,對照未知樣本中OD值,即可算出標本中IL-10 濃度。
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