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ERM-BF427d 98140玉米標準品材料特性簡介

發布時間: 2025-10-21  點擊次數: 120次

98140 玉米是由杜邦先鋒公司研發的抗蟲耐除草劑轉基因品種,通過農桿菌轉化法轉入cry1F 基因(編碼 Cry1F 毒蛋白,抗鱗翅目害蟲如歐洲玉米螟)和pat 基因(編碼草胺膦乙酰轉移酶,耐草胺膦類除草劑),已在全球 20 余個國家 / 地區獲批種植或進口,其中美國、加拿大批準用于食品 / 飼料加工,中國批準作為加工原料(農業部 2017 年第 2578 號公告)。

當前轉基因玉米檢測存在兩大核心痛點:一是不同檢測平臺(如 qPCR、dPCR)的引物探針設計差異,導致同一樣品檢測結果偏差可達 18%-25%(如歐盟聯合實驗室比對數據);二是缺乏基質匹配的可溯源標準品,造成跨境貿易中 “閾值判定爭議"(如歐盟 0.9% 標簽閾值)。為此,歐盟聯合研究中心參考物質與測量研究所(JRC-IRMM)研制 ERM-BF427d,作為全球的首l個 98140 玉米有證參考物質(CRM),ERM-BF427d 98140玉米標準品旨在統一檢測體系量值溯源鏈,支撐食品飼料標簽合規、跨境貿易互認及轉基因監管執法。



物質特性與分子基礎

1. 分子靶標特征

ERM-BF427d 98140玉米標準品靶向 98140 玉米的兩個核心外源基因片段,均匹配國際標準化組織(ISO)及各國監管機構推薦的檢測靶標:

cry1F 基因:源自蘇云金桿菌,編碼的 Cry1F 毒蛋白可特異性結合害蟲中腸受體,基因片段長度 492 bp,與其他抗蟲基因(如 cry1Ab、cry2Ab)同源性<10%,避免交叉反應;

pat 基因:源自鏈霉菌,編碼的酶可降解草胺膦,基因片段長度 327 bp,符合歐盟委員會法規(EC)No 641/2004 規定的定性檢測靶標序列。

兩基因的側翼序列均為玉米基因組片段(Zm-adh1 啟動子、nos 終止子),確保檢測特異性。


2. 物質形態與組成

ERM-BF427d 98140玉米標準品采用凍干粉末形態(天然玉米基質載體),溶解后為均一混懸液,標準儲存液組成如下:

活性成分:98140 玉米基因組 DNA(純度≥97%,瓊脂糖電泳無降解);

基質載體:非轉基因玉米粉(含 1.2% 玉米蛋白、0.3% 膳食纖維,模擬實際檢測基質);

緩沖體系:20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.5)、2 mmol/L EDTA(螯合金屬離子,保護 DNA);

穩定劑:8%(w/v)蔗糖(防止凍干過程中 DNA 變性)。

整套標準品含 4 個濃度梯度(ERM-BF427d1-d4),覆蓋轉基因檢測全量程需求:

編號
轉基因成分含量(%)
擴展不確定度(k=2)
ERM-BF427d1
10.0
±0.9
ERM-BF427d2
1.0
±0.13
ERM-BF427d3
0.1
±0.016
ERM-BF427d4
0.01
±0.002













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