ERM-DA347 孕酮標準品使用規(guī)范與操作要點 

（一）復(fù)溶操作與質(zhì)量控制 

復(fù)溶是影響量值準確的關(guān)鍵步驟，必須嚴格遵循以下規(guī)范：使用經(jīng)校準的移液槍，準確加入（1.00±0.01）mL 20-22℃的超純水，沿安瓿內(nèi)壁緩慢注入，避免產(chǎn)生氣泡； 

用惰性塑料薄膜密封安瓿口，輕輕倒置 5 次后靜置 15 分鐘，再旋轉(zhuǎn)混合至粉末完l全溶解，總復(fù)溶時間約為 45 分鐘，不可劇烈振蕩以免破壞血清基質(zhì)結(jié)構(gòu)； 

復(fù)溶后需立即進行均勻性核查：取 2 份平行樣測定，RSD 應(yīng)小于 2.0%，否則需重新混合。 

（二）取樣與檢測適配性

 該ERM-DA347 孕酮標準品適用于多種檢測技術(shù)，不同方法的前處理需注意基質(zhì)兼容性： 

免疫檢測法：復(fù)溶后可直接進樣，無需額外處理，但需扣除血清基質(zhì)空白（可采用不含孕酮的血清基質(zhì)標準品 ERM-DA348R 作為空白對照）； 

色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用法：需采用液液萃取或固相萃取去除蛋白質(zhì)基質(zhì)，推薦使用正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 3:2）作為萃取劑，可使孕酮回收率穩(wěn)定在 85%-105% 之間；最小取樣量為 100 μL（復(fù)溶后體積），低于此量易因基質(zhì)不均勻?qū)е聹y量偏差。 

（三）ERM-DA347 孕酮標準品常見操作誤區(qū)與規(guī)避

 誤區(qū) 1：冷凍儲存的安瓿直接開蓋復(fù)溶 —— 易導(dǎo)致空氣中的水蒸氣冷凝進入樣品，造成稀釋誤差，需嚴格執(zhí)行室溫平衡步驟；

誤區(qū) 2：復(fù)溶后放置過夜檢測 —— 孕酮在水溶液中易發(fā)生水解，8 小時后含量下降可達 5% 以上，必須現(xiàn)配現(xiàn)用；

 誤區(qū) 3：使用含表面活性劑的稀釋液 —— 會破壞血清蛋白結(jié)構(gòu)，改變孕酮結(jié)合狀態(tài)，僅可使用無添加劑的超純水復(fù)溶。

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